培(pei)養(yang)微(wei)生(sheng)物(wu)的(de)方(fang)法(fa)步驟

　　微(wei)生(sheng)物(wu)培(pei)養(yang)所培養(yang)的(de)微(wei)生(sheng)物(wu)通常是病(bing)菌(jun)、細(xi)菌(jun)、放(fang)線菌(jun)、真(zhen)菌(jun)等(deng)，屬於生(sheng)物(wu)培(pei)養(yang)的(de)壹(yi)種。
 

　　微生(sheng)物(wu)培(pei)養(yang)步驟：
 

　　1.配置(zhi)不(bu)同(tong)濃(nong)度的(de)營養(yang)液稀釋液:取(qu)營養(yang)液1ml溶(rong)於9ml無菌(jun)水(shui)中(zhong),振(zhen)蕩(dang) 5min配成(cheng)10%的(de)溶(rong)液.
 

　　2.將容器口靠(kao)近(註(zhu)意不(bu)是對(dui)著)酒(jiu)精燈(deng)燈焰用吸管(guan)從(cong)此(ci)溶(rong)液中吸取(qu)1ml加入到裝(zhuang)有9ml無菌(jun)水(shui)的(de)試(shi)管(guan)中(zhong).以(yi)此(ci)類(lei)推制成(cheng)1%,0.1%,0.01%等(deng)不同(tong)濃(nong)度的(de)稀釋液.
 

　　3.將試(shi)管(guan)口靠(kao)近(註(zhu)意不(bu)是對(dui)著)酒(jiu)精燈(deng)燈焰,左手拿(na)試(shi)管(guan),右(you)手(shou)托培養(yang)皿(僅(jin)露(lu)壹條(tiao)小縫(feng),且(qie)靠(kao)近燈焰).將溶(rong)液倒入培養(yang)皿中(zhong),在各培(pei)養(yang)皿上(shang)標(biao)上(shang)濃(nong)度.
 

　　4.將有細菌(jun)生(sheng)長的樣品(pin)容器口靠(kao)近(註(zhu)意不(bu)是對(dui)著)酒(jiu)精燈(deng)燈焰,用接種環挑取(qu)菌(jun)落上(shang)的(de)少量菌(jun)體(ti)加入10%的營養(yang)液中.把接種環放在酒(jiu)精燈(deng)上(shang)灼(zhuo)燒滅菌(jun),再(zai)次(ci)取(qu)樣加入盛1%的(de)營養(yang)液的培養(yang)皿(僅(jin)露(lu)壹條(tiao)小縫(feng),且(qie)靠(kao)近燈焰)中.重(zhong)復(fu)這(zhe)個(ge)操作,將各(ge)濃(nong)度的(de)營養(yang)液接上(shang)種.
 

　　5.輕輕搖勻接上(shang)種的培養(yang)皿,置(zhi)於恒(heng)溫(wen)箱(xiang)內(nei)37攝(she)氏度保存,3天後(hou)就(jiu)有菌(jun)落出現.
 

　　微(wei)生(sheng)物(wu)培(pei)養(yang)的(de)基本條(tiao)件：
 

　　1、影(ying)響微生(sheng)物(wu)生(sheng)長的因(yin)素
 

　　微生(sheng)物(wu)的(de)生(sheng)長，除了受(shou)本身(shen)的(de)遺傳特(te)性(xing)決定外(wai)，還(hai)受(shou)到外界(jie)許多因素的影(ying)響。影響微生(sheng)物(wu)生(sheng)長的因(yin)素很多，簡要(yao)介(jie)紹如下。
 

　　1) 營養(yang)物(wu)濃(nong)度
 

　　細(xi)菌(jun)的(de)生(sheng)長率與(yu)營養(yang)物(wu)的(de)濃(nong)度有關(guan):μ=μmax*C/(K+C) ，營養(yang)物(wu)濃(nong)度與(yu)生(sheng)長率的(de)關(guan)系曲(qu)線(xian)是典型的(de)雙曲(qu)線(xian)。
 

　　K值是細(xi)菌(jun)生(sheng)長的很基本的(de)特(te)性(xing)常數。它(ta)的(de)數值很小，表(biao)明細(xi)菌(jun)所需要的(de)營養(yang)濃(nong)度非(fei)常之(zhi)低(di)，所以在自然(ran)界(jie)中(zhong)，它們到處(chu)生(sheng)長。然而(er)營養(yang)太(tai)低(di)時(shi)，細菌(jun)生(sheng)長就(jiu)會(hui)遇到困(kun)難(nan)，甚(shen)至還(hai)會(hui)死亡。這(zhe)是因為除了生(sheng)長需要能(neng)量以外(wai)，細菌(jun)還(hai)需要能(neng)量來維(wei)持它(ta)的(de)生(sheng)存。這(zhe)種能量稱為(wei)維持(chi)能(neng)。另(ling)壹方(fang)面，隨著營養(yang)物(wu)濃(nong)度的(de)增(zeng)加，生(sheng)長率愈接近最大值。
 

　　2)溫度(du)
 

　　在壹定(ding)的溫(wen)度(du)範圍(wei)內(nei)，每(mei)種微生(sheng)物(wu)都(dou)有自已(yi)的生(sheng)長溫度(du)三(san)基點：最低(di)生(sheng)長溫度(du)、最(zui)適(shi)生(sheng)長溫度(du)和最(zui)高(gao)生(sheng)長溫度(du)。在生(sheng)長溫度(du)三(san)基點內(nei)，微(wei)生(sheng)物(wu)都(dou)能生(sheng)長，但生(sheng)長速(su)率不(bu)壹(yi)樣。微生(sheng)物(wu)只有處(chu)於最(zui)適(shi)生(sheng)長溫度(du)時(shi)，生(sheng)長速(su)度(du)才(cai)最快，代時(shi)最短(duan)。超過(guo)最(zui)低(di)生(sheng)長溫度(du)，微(wei)生(sheng)物(wu)不(bu)會(hui)生(sheng)長，溫度(du)太(tai)低(di)，甚(shen)至會(hui)死亡。超過(guo)最(zui)高生(sheng)長溫度(du)，微(wei)生(sheng)物(wu)也(ye)要停止(zhi)生(sheng)長，溫度(du)過(guo)高(gao)。也(ye)會(hui)死亡。壹般情況(kuang)下，每(mei)種微生(sheng)物(wu)的(de)生(sheng)長溫度(du)三(san)基點是恒(heng)定(ding)的。但也(ye)常受(shou)其它(ta)環(huan)境條件的(de)影響而發生(sheng)變(bian)化。
 

　　根據(ju)微生(sheng)物(wu)最(zui)適(shi)生(sheng)長溫度(du)的(de)不(bu)同(tong)，可將它(ta)們分為(wei)三(san)個(ge)類型：
 

　　a.嗜(shi)冷微(wei)生(sheng)物(wu)：其(qi)是適(shi)生(sheng)長溫度(du)多數在-10℃-20℃之(zhi)間(jian)
 

　　b.中(zhong)溫(wen)微(wei)生(sheng)物(wu)：其(qi)最適(shi)生(sheng)長溫度(du)壹(yi)般在20℃-45℃之(zhi)間(jian)
 

　　c.嗜(shi)熱(re)微(wei)生(sheng)物(wu)：生(sheng)長溫度(du)在45℃以上(shang)。
 

　　3)水(shui)分(fen)
 

　　水(shui)分(fen)是(shi)微(wei)生(sheng)物(wu)進(jin)行(xing)生(sheng)長的必(bi)要(yao)條(tiao)件。芽孢、孢(bao)子(zi)萌發，首(shou)先(xian)需要水(shui)分(fen)。微(wei)生(sheng)物(wu)是(shi)不能脫離水(shui)而(er)生(sheng)存的(de)。但(dan)是微(wei)生(sheng)物(wu)只能在水(shui)溶(rong)液中生(sheng)長，而不(bu)能(neng)生(sheng)活在純水(shui)中(zhong)。各(ge)種微生(sheng)物(wu)在不能(neng)生(sheng)長發育的水(shui)分(fen)活性範圍(wei)內(nei)，均(jun)具有狹(xia)小的(de)適(shi)當(dang)的(de)水(shui)分(fen)活性區域。
 

　　4)氧氣
 

　　按照(zhao)微生(sheng)物(wu)對(dui)氧氣的需要情況(kuang)，可將它(ta)們分為(wei)以(yi)下五個(ge)類型。
 

　　a.需氧微(wei)生(sheng)物(wu)：這(zhe)類微生(sheng)物(wu)需要氧(yang)氣供呼吸之(zhi)用。沒有氧氣，便不能(neng)生(sheng)長，但是(shi)高(gao)濃(nong)度的(de)氧氣對(dui)需氧微(wei)生(sheng)物(wu)也(ye)是有毒(du)的(de)。很多需氧微(wei)生(sheng)物(wu)不(bu)能在氧氣濃(nong)度大(da)於大(da)氣中氧(yang)氣濃(nong)度的(de)條件下生(sheng)長。絕大(da)多數微(wei)生(sheng)物(wu)都(dou)屬於這(zhe)個(ge)類型。