磁(ci)力(li)架(jia)在(zai)樣(yang)品(pin)分(fen)離中的應(ying)用技巧

　　磁(ci)力(li)架(jia)是(shi)基於(yu)磁(ci)吸(xi)分(fen)離原(yuan)理實現(xian)目(mu)標(biao)樣(yang)品(pin)富集、純(chun)化的工(gong)具(ju)，廣泛(fan)用於(yu)分(fen)子(zi)生(sheng)物學(xue)、微生(sheng)物檢(jian)測、臨(lin)床檢驗(yan)等(deng)領(ling)域(yu)，搭(da)配磁(ci)性(xing)微球(qiu) / 磁(ci)珠(zhu)使用時，掌(zhang)握(wo)以(yi)下技巧可大幅(fu)提(ti)升分(fen)離效(xiao)率與(yu)樣(yang)品(pin)純(chun)度。
 

　　壹(yi)、 基礎(chu)操(cao)作(zuo)技巧(通(tong)用型(xing)，新(xin)手必(bi)看(kan))
 

　　1. 磁(ci)珠(zhu)與樣(yang)品(pin)的充(chong)分結(jie)合
 

　　加磁(ci)珠(zhu)後，需將(jiang)樣(yang)品(pin)管(guan)輕(qing)柔(rou)顛倒混勻(yun)(避(bi)免劇(ju)烈震(zhen)蕩(dang)產(chan)生氣(qi)泡)，室溫靜(jing)置(zhi)或恒(heng)溫孵育(yu)，孵育(yu)時間(jian)根(gen)據(ju)磁(ci)珠(zhu)說明(ming)書調(tiao)整(zheng)(通(tong)常 5–20 min)。
 

　　對(dui)於(yu)粘稠樣(yang)品(pin)(如(ru)血液、組織勻(yun)漿(jiang))，可適(shi)當(dang)延(yan)長(chang)孵育(yu)時間(jian)，或低(di)速(su)渦旋(xuan)(轉速(su)<1000 rpm)10–20 s，促進磁(ci)珠(zhu)與目(mu)標(biao)物質(zhi)結(jie)合。
 

　　2. 磁(ci)吸(xi)分(fen)離的最(zui)佳操(cao)作(zuo)
 

　　將(jiang)樣(yang)品(pin)管(guan)垂直(zhi)放(fang)入磁(ci)力(li)架(jia)卡(ka)槽(cao)，確保(bao)管(guan)壁(bi)與(yu)磁(ci)條緊密(mi)貼(tie)合，保(bao)證(zheng)磁(ci)吸(xi)力(li)度均勻(yun)。
 

　　靜(jing)置(zhi)時間(jian)需足夠：普通(tong)磁(ci)力(li)架(jia)靜(jing)置(zhi) 1–3 min，待磁(ci)珠(zhu)完(wan)全(quan)吸(xi)附至管(guan)壁(bi)、溶(rong)液澄清後，再(zai)進行下壹(yi)步操作(zuo)；高(gao)黏度樣(yang)品(pin)可(ke)延(yan)長(chang)至 5 min。
 

　　嚴禁未(wei)完(wan)全(quan)磁(ci)吸(xi)時吸(xi)液，否則會(hui)導(dao)致(zhi)磁(ci)珠(zhu)流失(shi)，降低回收率(lv)。
 

　　3. 洗滌(di)與洗(xi)脫的關鍵細(xi)節
 

　　洗(xi)滌(di)時，先將(jiang)樣(yang)品(pin)管(guan)從(cong)磁(ci)力(li)架(jia)取下，加入洗(xi)滌(di)液後輕(qing)柔(rou)混勻(yun)，再(zai)放(fang)回(hui)磁(ci)力(li)架(jia)磁(ci)吸(xi)，待溶(rong)液澄清後棄(qi)去廢(fei)液，重(zhong)復(fu)洗滌(di) 2–3 次。
 

　　洗(xi)脫時，取下樣(yang)品(pin)管(guan)，加入洗(xi)脫(tuo)液後充分(fen)混勻(yun)，可(ke)根(gen)據(ju)需求恒(heng)溫孵育(yu) 5–10 min，再(zai)放(fang)回(hui)磁(ci)力(li)架(jia)磁(ci)吸(xi)，吸(xi)取上(shang)清液即為(wei)純(chun)化後的目(mu)標(biao)樣(yang)品(pin)。
 

　　二、 不同場景(jing)的專(zhuan)項應(ying)用技巧
 

　　1. 核(he)酸提(ti)取場(chang)景(jing)
 

　　選擇(ze)適(shi)配核(he)酸類(lei)型(xing)的磁(ci)珠(zhu)(如(ru) DNA 磁(ci)珠(zhu)、RNA 磁(ci)珠(zhu))，磁(ci)力(li)架(jia)建議(yi)選八聯(lian)管(guan)磁(ci)力(li)架(jia)，適(shi)配 96 孔(kong)板(ban)高通(tong)量操(cao)作。
 

　　磁(ci)吸(xi)分(fen)離時，保(bao)持(chi)樣(yang)品(pin)管(guan)直立，避(bi)免磁(ci)珠(zhu)吸附不(bu)均(jun)；洗脫(tuo)液建議(yi)用預熱的 TE 緩(huan)沖液或去(qu)離子水(shui)，提(ti)升核(he)酸洗(xi)脫效(xiao)率。
 

　　2. 細(xi)胞(bao)分選場(chang)景(jing)
 

　　選用大孔(kong)徑磁(ci)力(li)架(jia)或(huo)專用細(xi)胞(bao)分選磁(ci)力(li)架(jia)，避(bi)免擠壓細(xi)胞(bao)導(dao)致(zhi)破(po)裂。
 

　　磁(ci)吸(xi)過(guo)程中保(bao)持(chi)低溫(wen)環境(4℃)，減(jian)少細(xi)胞(bao)活性(xing)損失；分(fen)選後用培養(yang)基重(zhong)懸細(xi)胞(bao)時，需緩(huan)慢(man)吹(chui)打，避(bi)免細(xi)胞(bao)成團(tuan)。
 

　　3. 蛋白(bai)純(chun)化場(chang)景(jing)
 

　　搭配蛋白(bai)特(te)異性(xing)磁(ci)珠(zhu)使用，磁(ci)力(li)架(jia)選擇(ze)微量離心(xin)管(guan)磁(ci)力(li)架(jia)，適(shi)合小體積(ji)樣(yang)品(pin)(0.5–2 mL)。
 

　　洗(xi)滌(di)液需含適(shi)量鹽(yan)離子，降低非特(te)異性(xing)結(jie)合；洗脫時可(ke)通(tong)過調(tiao)整(zheng) pH 值(zhi)或加入競爭肽，提(ti)高蛋白(bai)純(chun)度。
 

　　三、 提(ti)升分(fen)離效(xiao)果(guo)的避(bi)坑技巧
 

　　磁(ci)力(li)架(jia)選型(xing)匹(pi)配：小體積(ji)樣(yang)品(pin)(<500 μL)用微量磁(ci)力(li)架(jia)，高(gao)通(tong)量實驗(yan)用 96 孔(kong)板(ban)磁(ci)力(li)架(jia)，避(bi)免 “大材小(xiao)用” 或(huo) “小架大用” 導(dao)致(zhi)的分(fen)離不均。
 

　　避(bi)免磁(ci)珠(zhu)團聚(ju)：磁(ci)珠(zhu)儲(chu)存(cun)時需密封(feng)避(bi)光(guang)，使(shi)用前(qian)恢復(fu)至室溫並輕(qing)柔(rou)混勻(yun)；若(ruo)出現(xian)團(tuan)聚，可低(di)速(su)渦旋(xuan)後再(zai)使(shi)用。
 

　　防(fang)止交叉汙(wu)染：不同(tong)樣(yang)品(pin)需使用獨(du)立的磁(ci)力(li)架(jia)卡(ka)槽(cao)或(huo)壹(yi)次性(xing)套管(guan)，實驗(yan)後及(ji)時清潔磁(ci)力(li)架(jia)表(biao)面(用 75% 乙(yi)醇擦拭，晾(liang)幹(gan)後使用)。
 

　　優(you)化磁(ci)吸(xi)時間(jian)：根(gen)據(ju)樣(yang)品(pin)體積(ji)和磁(ci)珠(zhu)濃度調(tiao)整(zheng)，體積(ji)越(yue)大、磁(ci)珠(zhu)濃度越(yue)高，所(suo)需磁(ci)吸(xi)時間(jian)越(yue)長(chang)，以(yi)溶(rong)液完(wan)全(quan)澄清為標(biao)準(zhun)。
 

　　四(si)、 維(wei)護保(bao)養(yang)輔(fu)助(zhu)技巧
 

　　實驗(yan)後及(ji)時清理磁(ci)力(li)架(jia)表(biao)面殘留(liu)的液體和磁(ci)珠(zhu)，避(bi)免磁(ci)珠(zhu)殘留(liu)影響後續吸(xi)附效(xiao)果(guo)。
 

　　磁(ci)力(li)架(jia)應(ying)遠(yuan)離強(qiang)磁(ci)場(chang)環(huan)境和尖銳(rui)物品(pin)，防(fang)止磁(ci)條磁(ci)力(li)衰(shuai)減(jian)或外殼(ke)損壞。