關(guan)於(yu)特異性的(de)選擇(ze):特異性的(de)選擇(ze)首(shou)要需求考(kao)慮(lv)四個(ge)方(fang)面(mian):蛋(dan)白特異性、實(shi)驗(yan)方法(fa)特異性、符(fu)號(hao)物(wu)的特異性、種(zhong)屬(shu)特異性。
1、蛋(dan)白特異性:針(zhen)對(dui)需求檢(jian)測的蛋(dan)白查(zha)找抗體(ti),幾(ji)個(ge)細(xi)節(jie)要差異,重組表達的(de)蛋(dan)白和(he)內源(yuan)性蛋(dan)白的(de)檢(jian)測,對(dui)抗體(ti)的(de)要求是(shi)不(bu)相同(tong)的(de),留(liu)心檢(jian)查(zha)抗體(ti)闡(chan)明書(shu)的(de)檢(jian)測闡明。假(jia)定(ding)重組蛋(dan)白不(bu)是全(quan)長(chang)表達,則(ze)需求留(liu)心抗體(ti)的(de)免疫原(yuan)區(qu)域是否在(zai)重組蛋(dan)白區(qu)域內。
2、符(fu)號(hao)物(wu)的特異性壹(yi)般(ban)根(gen)據(ju)實(shi)驗(yan)操(cao)作(zuo)的實(shi)驗方(fang)法(fa)不(bu)會(hui)運(yun)用帶有符(fu)號(hao)的(de)壹(yi)抗,比方WB、IHC等,都(dou)是(shi)通(tong)過(guo)二抗類的試劑(ji)符(fu)號(hao)抵(di)達效(xiao)果(guo)出現(xian)的目(mu)的(de)。
可(ke)是(shi)根(gen)據(ju)儀(yi)器(qi)剖析(xi)的壹(yi)些實(shi)驗,或許(xu)就會(hui)運(yun)用到直接符(fu)號(hao)的(de)壹(yi)抗,比方流(liu)式實(shi)驗(yan)。那(na)麽需求了(le)解(jie)到自己(ji)行(xing)將(jiang)運(yun)用的(de)儀器(qi)能(neng)檢(jian)測到的熒(ying)光(guang)規模,不通(tong)的參數要求選擇(ze)對(dui)應的(de)符(fu)號(hao)物(wu)。在(zai)免疫熒(ying)光(guang)雙標實(shi)驗中,需求選配(pei)不(bu)同(tong)的熒(ying)光(guang)物(wu)。
3、實驗方(fang)法(fa)特異性:現(xian)在(zai)運(yun)用抗體(ti)的(de)實驗方(fang)法(fa)有許(xu)多(duo),不(bu)同(tong)的運(yun)用方(fang)法(fa)過(guo)程中,由(you)於(yu)對(dui)蛋(dan)白樣品的處理方法(fa)不(bu)相(xiang)同(tong),蛋(dan)白的(de)含(han)量(liang)有差異,對(dui)抗體(ti)的(de)辨認表位和(he)效(xiao)價(jia)要求都(dou)是(shi)不相(xiang)同(tong)的(de)。具(ju)體(ti)的(de)根(gen)據(ju)闡(chan)明書(shu)註(zhu)明的(de)產(chan)品應用方法(fa)進行(xing)選擇(ze)。
4、種(zhong)屬(shu)特異性:同(tong)種(zhong)蛋(dan)白不(bu)同物(wu)種,有著(zhe)或大或(huo)小(xiao)的差異。現在(zai)大部(bu)分(fen)商(shang)品化(hua)抗體(ti)都(dou)是以人(ren)源(yuan)蛋(dan)白序(xu)列為(wei)模板(ban)重組蛋(dan)白或(huo)規劃(hua)多肽(tai)抗原的,根(gen)據(ju)蛋(dan)白的(de)同源(yuan)性的情(qing)況(kuang)與其(qi)他(ta)種屬(shu)發(fa)作(zuo)穿(chuan)插(cha)反(fan)應。需求參照(zhao)闡明書(shu)註(zhu)明的(de)可(ke)反(fan)應種(zhong)屬(shu)信(xin)息。壹(yi)些(xie)稀(xi)有種屬(shu)很(hen)難(nan)找到抗體(ti),能(neng)夠(gou)通(tong)過(guo)蛋(dan)白的(de)序列(lie)比對(dui),選擇(ze)同(tong)源(yuan)序(xu)列(lie)免疫的(de)抗體(ti)。