蛋白表(biao)達系(xi)統(tong)優缺(que)點(dian)分(fen)別是什(shen)麽(me)?
更(geng)新時間(jian)：2022-01-14 點(dian)擊(ji)次數：3660
蛋白表(biao)達系(xi)統(tong)是(shi)指由(you)宿(xiu)主、外源基(ji)因、載(zai)體和(he)輔(fu)助成分(fen)組(zu)成的體系(xi)，通過這(zhe)個(ge)體系(xi)可(ke)以實(shi)現(xian)外(wai)源基(ji)因在(zai)宿主中表(biao)達的(de)目的。大腸(chang)桿(gan)菌(jun)表(biao)達系(xi)統(tong)：對(dui)於表(biao)達不(bu)同(tong)的(de)蛋白，需要(yao)采(cai)用不(bu)同的載體。目前已知的大腸(chang)桿(gan)菌(jun)的(de)表(biao)達載(zai)體可(ke)分(fen)為非融(rong)合型(xing)表(biao)達載(zai)體和(he)融(rong)合型(xing)表(biao)達載(zai)體兩種(zhong)。非(fei)融(rong)合表(biao)達是(shi)將(jiang)外(wai)源基(ji)因插(cha)到(dao)表(biao)達載(zai)體強啟(qi)動(dong)子(zi)和有(you)效(xiao)核(he)糖體結合位(wei)點(dian)序列(lie)下(xia)遊(you)，以外(wai)源基(ji)因mRNA的(de)AUG為起始(shi)翻(fan)譯(yi)，表(biao)達產(chan)物在(zai)序列(lie)上(shang)與天然(ran)的(de)目的蛋白壹(yi)致。融(rong)合表(biao)達是(shi)將(jiang)目的蛋白或多肽與另(ling)壹個(ge)蛋白質(zhi)或多肽片段(duan)的DNA序列(lie)融(rong)合並(bing)在(zai)菌(jun)體內(nei)表(biao)達。融(rong)合型(xing)表(biao)達的(de)載(zai)體包(bao)括(kuo)分(fen)泌表(biao)達載(zai)體、帶(dai)純(chun)化標簽的表(biao)達載(zai)體、表(biao)面(mian)呈(cheng)現(xian)表(biao)達載(zai)體、帶(dai)伴(ban)侶(lv)的(de)表(biao)達載(zai)體。
蛋白表(biao)達系(xi)統(tong)優缺(que)點(dian)分(fen)別是什(shen)麽(me)：
優點(dian)：遺傳(chuan)背(bei)景(jing)清楚；繁殖快、成本低、抗汙染能(neng)力強；表(biao)達量(liang)高(gao)、表(biao)達產(chan)物分(fen)離(li)純(chun)化(hua)相(xiang)對(dui)簡單、穩(wen)定性(xing)好；商品化的(de)載體和(he)菌(jun)株(zhu)種(zhong)類(lei)非(fei)常(chang)齊全、適(shi)用範(fan)圍廣等。
缺(que)點(dian)：
可(ke)能會(hui)產(chan)生壹(yi)些致熱(re)源(內(nei)毒素)，並(bing)且(qie)大腸(chang)桿(gan)菌(jun)本身含(han)有(you)內(nei)毒素和(he)有(you)毒蛋白，可(ke)能混(hun)雜(za)在(zai)終產(chan)物裏(li)；
沒有(you)真(zhen)核(he)轉錄後加(jia)工(gong)的功(gong)能(neng)，不能進行mRNA的(de)剪接，所(suo)以只(zhi)能表(biao)達cDNA而(er)不能表(biao)達真(zhen)核(he)的(de)基(ji)因組(zu)基(ji)因；
沒(mei)有(you)真(zhen)核(he)翻(fan)譯(yi)後(hou)加(jia)工(gong)的功(gong)能(neng)，表(biao)達產(chan)生的(de)蛋白質(zhi)，不(bu)能進行糖(tang)基(ji)化、磷(lin)酸化等修(xiu)飾(shi)，難(nan)以形成正(zheng)確的二(er)硫鍵(jian)配(pei)對(dui)和(he)空間(jian)構(gou)像折疊(die)，因而(er)產(chan)生的(de)蛋白質(zhi)常(chang)沒有(you)足夠(gou)的生(sheng)物(wu)學活性(xing)；
表(biao)達的(de)蛋白質(zhi)經(jing)常是(shi)不(bu)溶的，會在(zai)細菌(jun)內(nei)聚(ju)集(ji)成包(bao)涵(han)體，尤其(qi)當表(biao)達目的蛋白量(liang)超(chao)過(guo)細菌(jun)體總(zong)蛋白量(liang)10%時，就很容(rong)易(yi)形成包(bao)涵(han)體。生(sheng)成包(bao)涵(han)體的(de)原(yuan)因可(ke)能有(you)是(shi)蛋白質(zhi)合成快速(su)太(tai)快，多肽鏈相(xiang)互(hu)纏(chan)繞(rao)，缺(que)乏(fa)使(shi)多肽鏈正(zheng)確折疊(die)的因素，導致疏水(shui)基(ji)因外(wai)露(lu)等。細(xi)菌(jun)裂解後(hou)，包(bao)涵(han)體的(de)離(li)心(xin)後(hou)的沈(chen)澱中，雖(sui)然(ran)有(you)利(li)於(yu)目的蛋白的(de)初(chu)步純(chun)化(hua)，但(dan)無(wu)生物(wu)活性(xing)的不(bu)溶(rong)性(xing)蛋白，要(yao)經(jing)過復(fu)性(xing)，使(shi)其(qi)重新散開(kai)、重新折疊(die)成具(ju)有(you)天(tian)然(ran)蛋白構(gou)象和良(liang)好生(sheng)物(wu)活性(xing)的蛋白質(zhi)，常(chang)常是(shi)壹(yi)件(jian)很困難(nan)的事(shi)情(qing)。也(ye)可(ke)以設計載體使(shi)大腸(chang)桿(gan)菌(jun)分(fen)泌表(biao)達出(chu)可(ke)溶性(xing)目的蛋白，但(dan)表(biao)達量(liang)往往不(bu)高(gao)。
地址：保定市惠陽(yang)街(jie)369號保定中關(guan)村(cun)創(chuang)新基(ji)地研發(fa)中心(xin)15層(ceng)1508室
傳(chuan)真(zhen)：
當前位(wei)置：
郵箱：